磷酸缓冲液的配制_pbs缓冲液配方表

HEPES缓冲剂，其化学名称为2-（4-（2-羟乙基）哌嗪）乙磺酸，CAS号7365-45-9。该试剂常见于生物化学实验中，它的主要功能是调节反应体系的酸碱度。在病毒保存液或是细胞保存液中，都可以见到它的身影。

市场上的HEPES主要分为粉末试剂和溶液试剂两种。其中，HEPES溶液的使用浓度一般维持在10-50mmol/L范围内，如在培养液中常见的20mmol/L的浓度，便能够发挥出其卓越的缓冲能力。

关于HEPES缓冲剂的特点，这种缓冲液在众多方面都表现得优于磷酸缓冲液。它对细胞无毒性，可以长时间地保持稳定的pH范围，这使它成为一种优质的离子缓冲剂。

针对HEPE缓冲剂的更多详解：

其解离常数为7.65（在20摄氏度下），而pH缓冲范围则是从6.6到8.6，通常适用于pH值为6.8至8.2的反应体系。HEPE缓冲剂既可以与氢氧化钠直接混合使用，也可以与盐混合后，再通过添加氢氧化钠来调整pH值。

一、制备500ml 1mol/L的HEPES stock solution：称取0.5摩尔（大约为119.15g）的羟乙基哌嗪乙磺酸，然后利用0.5M~1M的氢氧化钠来调整到所需的pH值，最终以蒸馏水定容，存放在4摄氏度的环境下。

二、关于添加了少量盐的HEPES buffer的配制：取HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g，利用0.5M NaOH水溶液调整pH值后，定容并低温保存。

三、关于2×HEPES缓冲盐溶液的配制方法：将特定量的NaCl、KCl、Na2HPO4.2H2O、葡聚糖以及HEPES溶解在90ml的蒸馏水中，然后利用0.5M NaOH调整至所需的pH值，再用蒸馏水定容至100ml。

虽然HEPES缓冲液体系的使用不如磷酸盐缓冲液PBS广泛，但它具有许多独特的优点。PBS的离子强度通常高于HEPES，而离子强度会影响混合溶液中其他溶质的溶解度。PBS能适用的地方，HEPES同样适用；但反过来，使用HEPES的地方，PBS通常无法替代。

值得提及的是，尽管HEPES缓冲剂与PIPES在功能上有所相似，但PIPES的水溶性较差，常以PIPES钠盐的形式存在。德晟公司提供的这两种缓冲剂均为粉末试剂，若有必要，也可将它们配制成特定浓度的即用型缓冲溶液。