northern印迹杂交
针对慢性乙型肝炎的治疗，尽管延长现有疗法周期，临床治愈率仍然较低。新型物核心蛋白抑制剂（CPIs）展现了抗病毒的潜力，能够针对病毒生命周期的多个阶段进行直接干预。Assembly Biosciences的研究团队最近对一种CPI进行了深入研究，这种物在抑制cccDNA合成方面表现出强大的潜力。
为了验证这种物的抗病毒活性，研究人员使用了多种实验细胞，包括诱导的HepAD38细胞系、感染的HepG2-NTCP细胞以及原代人肝细胞。他们也利用瞬时转染测定法和HBV稳定细胞系来验证其泛基因型活性。联合研究则是在HepAD38细胞中，通过一系列抑制浓度进行的。
通过Taqman PCR（qPCR）技术，使用特定的引物和探针定量HBV DNA。HBeAg和HBsAg的定量则通过ELISA完成。其他如HBV总RNA、衣壳化的pgRNA、衣壳以及衣壳相关的核心DNA等的检测则通过RT-qPCR、Northern印迹、b-DNA、蛋白印迹、酶免疫测定（EIA）和Southern印迹等技术完成。
研究发现，ABI-H3733在抑制病毒DNA复制方面表现出色，特别是在HepAD38细胞和原代人肝细胞中，其EC50值分别为5和12 nM。这种物还能有效降低感染的HepG2-NTCP细胞中的HBeAg、HBsAg和pgRNA水平，EC50分别为43和61 nM。
ABI-H3733的抗病毒活性具有泛基因型特点，并对已知的一些CPI耐性的病毒变体也有效。值得注意的是，它对其他病毒或细胞没有明显的活性或毒性。
联合研究预示，ABI-H3733与Nuc疗法联合使用时，对病毒的抑制作用具有协同效果。该物具有良好的物理性质，物相互作用潜力较低，并在多种物种中表现出有利的代动力学特征。
进一步的作用机制研究表明，ABI-H3733能增强阻断pgRNA衣壳化和已形成的衣壳的效果，导致含有rcDNA的衣壳在感染期间无法顺利运输到细胞核。通过Southern印迹分析，该物能抑制cccDNA的形成。
ABI-H3733作为一种新型CPIs，源于新的化学骨架，对HBV感染周期中的多个阶段具有显著的抑制活性。其增强的疗效和有利的临床前特征表明，有望将这一代CPI推进到临床开发中。
