制作PBST溶液超简单吐温20用量大公开
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制作PBST溶液其实非常简单,其中“吐温20”(Triton X-100)作为非离子表面活性剂,在溶液中起着关键作用,能有效减少非特异性结合,提高实验效果。所谓的“用量大公开”,指的是其在一个常见的实验配方中的基础用量,并非指需要大量添加。
一个经典的PBST配方是:将0.1 M的磷酸盐缓冲液(PBS)作为基础,然后加入吐温20。这里的“吐温20”的用量通常是以体积比来表示的,即在1升(L)的PBST溶液中,加入1毫升(mL)的吐温20。这个比例是0.1%(w/v),是一个非常经济且常用的浓度。
为什么这个用量是“大公开”且常用呢?因为对于大多数免疫印迹(Western Blot)、ELISA等实验来说,这个浓度的吐温20足以有效清洁固相载体(如硝酸纤维素膜或PVDF膜),去除未结合的抗体或蛋白质,同时又不至于过度洗涤导致目标分子洗脱。这个浓度的吐温20既能保证背景干净,又能维持良好的信号强度。
当然,根据具体的实验要求和蛋白特性,有时也可以微调吐温20的浓度,比如增加到0.05%或0.3%。但起始的“1 mL吐温20 / 1 L PBST”这个基础配方,就是那个简单又经典的“用量大公开”,非常容易制备,且效果可靠。

