od值是什么

四唑盐（MTT）比色法，乃是一种被普遍应用于细胞活力检测的有效方法。其核心原理是依赖活细胞线粒体内的酶促反应，充分展示了生物学的微妙之处。

一、MTT的化学特性及活性

MTT，全称3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，以其特有的和化学结构成为一种关键的试剂。作为一种非极性分子，它原本不溶于水，但当溶解在不含酚红的培养液或0.01 mol/L的PBS中时，便能呈现为明亮的。

二、细胞的代谢还原作用

在活跃的细胞中，特别是那些拥有正常线粒体功能的细胞，MTT能被还原成紫色的甲臜（formazan）。此一还原过程是经由细胞内的线粒体还原酶所催化，比如依赖NAD(P)H的脱氢酶。细胞通过其代谢活动将MTT转化为紫色的formazan，这一过程是MTT比色法的核心机制。

三、紫色formazan结晶的形成

经过还原后得到的formazan呈现出紫色，通常以结晶的形式存在于细胞内。这种紫色结晶不溶于水，但可以通过使用如二甲基亚砜（DMSO）这样的溶剂进行溶解。

四、吸光度的测量

通过分光光度计或酶联免疫检测仪，在特定的波长（如490nm或570nm）下测定溶解后的formazan溶液的吸光度值（OD值）。这一吸光度值与细胞的代谢活性紧密相关，细胞活力越强，形成的紫色formazan越多，测得的吸光度值也就越高。

五、应用及特点

MTT比色法因其高灵敏度、良好的重复性、简便的操作、经济性以及无放射性污染等优点而被广泛应用。在生物医学研究中，它被用于细胞增殖、细胞毒性测试以及物筛选等方面。需注意MTT还原后产生的甲瓒产物虽不溶于水但需溶解后方可检测，这既增加了工作量也可能对实验结果的准确性造成影响。用于溶解甲瓒的有机溶剂对实验者存在潜在的健康风险。

六、实验注意事项

MTT法主要用于检测细胞的相对数量和活力，而非绝对数量。实验过程中需严格控制如温度、pH值以及细胞接种密度等条件以确保结果的准确性。对于某些特定的细胞类型或实验条件，可能存在如细胞培养基成分、物或其他物质的吸光干扰等影响因素，需采取相应措施进行校正或优化实验条件。

总体而言，四唑盐（MTT）比色法以其简单、灵敏的特点在生物医学研究中得到了广泛应用。它通过测量活细胞将MTT还原为紫色formazan的能力来反映细胞的活力和增殖情况。